• 發文/公布日期：1987-03-19
• 文件類別：公告
• 文號：衛署藥字第00650607號
• 分類：藥品查驗登記、藥品查驗登記
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主旨：

公告「 B型肝炎疫苗檢驗基準」，如附件。

說明：

B型肝炎疫苗檢驗基準 ADSORBED HEPATITIS B VACCINE VACCINUM HEPATITIDIS B EXPLASMA HUMANUM 一、定義： B型肝炎疫苗為由肝功能正常之帶之原者血漿，以適當方法濃縮精製其 B型 肝炎表面抗原，經甲醛等適當不活化方法處理，並以氫氧化鋁吸著所製成之 製劑。 二、分裝前檢驗：在分裝前之製造過程中，應適時取樣，完成下列各項試驗。 (一)單一血袋血漿: 1.滅菌檢查：以血液培養基檢查之，不得呈現任何菌落。 2. B型肝炎表面抗原試驗：以適當之血清學方法測試 B型肝炎表面抗原。 3. B型肝炎表面抗原亞型試驗：以適當之血清學方法鑑別 B型肝炎表面抗原亞型 4.人類免疫缺乏病毒抗體(HIV) 試驗：以適當之血清學方法測試，人類免疫不全 病毒抗體不得呈陽性反應。 (二)混合血漿 1.滅菌檢查：取檢體10ML ，依照滅菌檢查法檢查之，應符合其規定。 2.結核桿菌檢查：依結核桿菌檢查法檢查之，應符合其規定。 3.外來病毒否定試驗： 1)動物接種試驗： (1)成熟小白鼠試驗： 共取體重15-20g之健康小白鼠30隻以上，各以三倍稀釋之檢體0.5ML施以腹 腔注射及0.03ML施以腦內注射,觀察21日，觀察期間，任何一隻均不得呈現 感染外來病毒，且存活率應在80％以上。 (2)吸吮期小白鼠試驗： 取生後24小時以內之吮乳期小白鼠60隻以上，各以三倍稀釋之檢體0.1ML施 以腹腔注射及0.01ML施以腦內注射，觀察14日，觀察期間，任何一隻小白 鼠均不得呈現感染外來病毒，且存活率應在80％以上。 2)細胞培養接種試驗： (1)人細胞培養試驗：取檢體5ML接種於人細胞培養之。觀寒14日，觀察期間 ，不得有外來病毒所引起之細胞病變。人細胞培養用WI-38或MRC-5細胞。 (2)猴細胞培養試驗：取檢體5ML，接種於猴細胞培養之。觀察14日，觀察期 間，不得有外來病所引起之細胞病變，猴細胞培養用非洲猴 (CEREOPITHECUS)腎細胞或VERO細胞。 3)孵化雞蛋接種試驗： 取約11日齡之孵化雞蛋20個以上，各以檢驗0.25ML接種於尿膜腔內觀察3日。 又取約6日齡之孵化雞蛋20個以上,各以檢體0.25ML接種於卵黃囊內觀察5-7 日。所有試驗觀察期間均不得呈現外來來病毒所引起之變化。 4)RETROVIRUS 否定試驗：取檢體１ML經離心後，取其沈澱物(PELLET)測定其 定轉錄(REVERSE TRANSCRIPTASE)，其檢驗中不得含有反轉錄之活性。 (三)純化後 B型肝炎表面抗原 1.滅菌檢查：取檢體10ML依照滅菌檢查法檢查之，應符合其規定。 2. B型肝炎表面抗原試驗：以靈敏度及再現性高之血清學方法如酵素免疫法或放 射免疫法測試 B型肝炎表面抗原。 3.總蛋白質含量：依照蛋白質定量法或其他適當方法測定其總蛋白質量。 4.純度試驗：以膠體電泳(PAGE)或其他適當方法測定特異 B型肝炎表面抗原蛋白 質及其他外來蛋白質,其 B型肝炎表面抗原蛋白質應為總蛋白質之95％以上。 5.B型肝炎病毒DNA否定試驗：取相當20人體劑量之 B型肝炎表面抗原為檢驗 ，用B型肝炎病毒DNA為探針 (PROBE)，能檢出 B型肝炎病毒DNA對照品之條件 進行DNA雜和(DNA HYBRIDIZATION)試驗，檢體中不得檢出有B型肝炎病毒DNA。 6.不活化用物質殘留試驗：以適當之方法測試處理抗原之甲醛及或其他不活化物 質。 (四)未加沈澱劑前調和液(FINAL AQUEOUS BULK) 1.黑猩猩安全試驗： 黑猩猩在試驗接種前最少觀察六個月且應符合下列條件： 1)由敏感之方法證實過去或現在無 B型肝炎病毒感染(HBsAG ，Anti-HBs及 Anti-HBc試驗陰性)。 2)試驗開始前三個月內最少抽取八次檢體(每週抽一次為原則)，其轉氨基 (AMINOTRANSFERASES)應有正常標準。 3)試驗開始八週前，最少有二次肝生檢且正常。 4)關於單獨適當處所，由未受 B型肝炎感染之人照顧。 5)絕未曾接種人血或其血液製劑。 試驗黑猩猩數不應少於二隻，各施以靜脈注射相當於10次人疫苗劑量，接種後 觀察六個月，其試驗應包括： (1)每週測定轉氨基 (每一黑猩猩保持正常，若發現任何不正常，應證實與 病毒性肝炎無關)。 (2)以敏感血清試驗法每週測定 B型及每月測定 A型肝炎病毒感染之標誌。 (3)每週測其體重，每天檢查其一般健康情形。 (4)每個月作肝生體鏡檢，尋找任何肝炎跡象。 試驗黑猩猩觀察期間，應經證實不呈現病理組織學或生化學之肝炎症狀，且 由血清學檢查應無 B型肝炎病毒之感染。 2.滅菌檢查：取檢體10ML依照滅菌檢查法檢查之，應符合其規定。 3.黴漿菌檢查：依照黴漿菌檢查法檢查之，應符合其規定。 4. B型肝炎表面抗原試驗：以可定量之血清學方法測試 B型肝炎表面抗原，其含 量每ML不得低於6UG。 5.純化用物質殘留試驗:以適當之方法測試純化過程可能殘留之有害物質。 (五)分製前疫苗懸浮液 1.滅菌檢查：取檢體10ML依照滅菌檢查法應符合其規定。 2.沈澱劑：檢體每ML之鋁含量不得超過1.25MG。 3.保藏劑：檢體如含有硫柳汞，其濃度不得超過0.012W/V％ 4.熱原試驗：本品應符合熱原試驗法之規定，每隻家兔使用一人體劑量。 三、成品 (一)性狀：本品經搖勻為混濁類似白色之懸浮液。 (二)鑑別：本品以適當血清學方法鑑別為 B型肝炎表面抗原。 (三)一般規定： 1.PH值：本品之RH值應為5.5-7.5。 2.甲醛：本品所含之甲醛不得超過0.012W/V％。 3.保藏劑：本品如含有硫柳汞，其濃度不得超過0.012W/V％。 4.沈澱劑：本品所含之鋁，每ML不得超過1.25MG。 5.滅菌檢查：本品應符合滅菌檢查法之規定。 6.異常毒性試驗：本品應符合異常毒性試驗之規定。 (四)效價測定： 免疫天竺鼠或小白鼠，其產生之抗HBs 抗體，以放射免疫測定法或其他適當方法 測定之。 1.材料：檢品及對照 B型肝炎疫苗（下稱對照品）稀釋液為生理食水或含沈澱 劑生理食水。 2.試驗動物：300-350g或生後約七週之天竺鼠五隻以上為一組或生後約五週之適 當品系小白鼠十隻以上為一組。 3.試驗：檢品及對照品各別稀釋為適當倍數連續稀釋皮下注射，小白鼠則施以皮 下或腹腔注射，每隻動物接種適量。免疫接種4-5 週後採血，分離其血清，各 血清之抗HBs 抗體價以放射免疫測定法或其他適當方法測定之。 4.判定：第一次試驗之相對效價不得低於0.667 ，如未能符合規定時，則進行第 二次試驗，其相對效價不得低於0.86；如仍未能符合規定時，則進行第三次試 驗，其相對效價不得低於1.0 。如仍與規定不符，則判定為不合格。 (五)標誌：本品之包裝標籤上應載明製品名稱，單位含量，注射用量，製造批號，製 造者之名稱及地址，許可證號、貯藏方法及失效日期等，並附以載明用法及注意 事項之說明書。 (六)貯藏法及有效期限：本品應置於經滅菌之中性玻璃容器內密封，於2-8℃ 保存， 有效期限為檢定合格之日起計算，為期二年。 (七)用途及劑量：本品為自動免疫劑，一次劑量1ml ，皮下或肌肉注射。